Western
Western blot实验需要准备什么试剂和耗材？
blot实验需要准备什么试剂和耗材？
试剂：tris、Hcl、Nacl、脱脂牛奶、甲醇、甘氨酸、tuwen20、一抗、二抗、显色剂及SDS-PAGE需要的试剂（tris、Hcl、TEMED、SDS、过硫酸铵、丙烯酰胺、N,N-甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、非预染蛋白Marker、甲醇、乙酸、考马斯亮蓝R250）、预染蛋白Marker耗材：滤纸、PVDF膜或NC膜、乳胶手套等仪器：电泳仪、电转槽、摇床、制冰机（电转时需冰浴）等
1×TAE缓冲液是什么意思？
按照242g Tris碱57.1ml冰乙酸100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）是配置1L 50x的缓冲液使用的时候取决于你的容器有多大，一般用一个2L的试剂瓶的话，就是40ml储存液 水补满到2L，然后拼命混匀就可以倒进电泳槽作电泳缓冲液或者配置agarose TAE胶了
dtnb溶液怎么配制？
方法一、试剂的配制：
1、Tris－HCL缓冲液（0.25M）：DDW准确配制后，用盐酸调节pH＝8.3；
2、半胱氨酸标准溶液（1mM）：准确称取0.017563gL－半胱氨酸（175.63），用1ml甲酸溶解，以DDW定容至100ml；
3、DTNB（分子量：396.35）标准溶液（10mM）：准确称取0.198175gDTNB用50mMNa2HPO4（pH＝7.0）配制成50ml溶液，存放于棕色瓶中，于暗处低温保 存备用4、DTNB分析溶液（0.1mM）：由1体积10mMDTNB标准液加99体积0.25M的Tris缓冲液配制而成，现用现配。二、标准曲线的制作;1、25℃条件下，用Tris缓冲液稀释半胱氨酸标准液配成梯度的稀释液（5.0ml）， 其浓度分别为：0.00mM、0.025mM、0.05mM、0.1mM、0.15mM、0.2mM；
2、取上述各浓度溶液1ml分别加入到5ml预先恒温于25℃水中的DTNB分析溶液，摇匀，准确静止10min，立即于波长412nm处测定吸光度值（A）。
根据目的蛋白的吸光度在标准曲线上读出对应的浓度即可
tris乙酸是什么试剂？
tris乙酸即Tris-乙酸电泳缓冲液。
Tris-乙酸电泳缓冲液即 Tris acetate-EDTA buffer，简称 TAE。
1×TAE 工作液中含有40mM Tris-acetate、1mM EDTA(pH8.0)。
TAE 是常用的 DNA 电泳缓冲液,本试剂是50倍浓缩的TAE主要由2M Tris-acetate，50mM EDTA组成，使用时需用蒸馏水或去离子水稀释50倍后使用。