tris缓冲液具体配制方法 转膜液的配制?

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tris缓冲液具体配制方法

转膜液的配制?

转膜液的配制?

转膜缓冲液的基础配方是Tris,甘氨酸和甲醇,这个没有疑问。 加不加SDS有两种说法 一种认为尽量不要加,因为加了之后SDS会影响转印效果,导致最终实验失败。只有在分子量较大的情况下(大于120KDa),浓度控制在0.01%之内。 一种认为任何情况下都要加,因为加了之后SDS可以消除电荷的影响,转印的结果不会受到影响。浓度可以在0.01%~0.1%之间。 所以可以用两种缓冲液都试一下,哪个效果好就用哪种。
转膜缓冲液的配制方法:39mM glycine 2.9g,48mM tris 5.8g, SDS 0.37g 加入600ml去离子水,充分搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至800ml后,加入200ml甲醇。室温保存。

tris碱溶液ph10配制方法?

一般先配置成1M的母液,用的时候稀释到10mM.
参考:1 M Tris buffer(缓冲范围pH7.0-8.5) 1L
1,称取121.1 g Tris-Base,加入700 ml双蒸水,放置转子,旋转混合溶解。,
2,pH计校准Tris-Base完全溶解后,,然后加入浓盐酸进行酸度调节(加入浓盐酸后温度会升高),调至接近目的pH时,观察温度变化并用加热(水浴,微波)或冰浴的方法调节温度至25 ℃±0.2 ℃,使温度在25 ℃±0.2 ℃时刚好达到所需pH值(pH值允许误差±0.01)。
3,pH值调节完毕后,用容量瓶定容至1 L,0.45μm滤膜过滤,倒入试剂瓶中保存,标记好日期和名称。
4,配1 L pH8.0的Tris,约需要42 ml浓盐酸。

如何配置ph8,5的5mMtris hcl缓冲液?

一般先配置成1m的母液,用的时候稀释到10mm.
参考:1mtrisbuffer(缓冲范围ph7.0-8.5)1l
1,称取121.1gtris-base,加入700ml双蒸水,放置转子,旋转混合溶解。,
2,ph计校准tris-base完全溶解后,,然后加入浓盐酸进行酸度调节(加入浓盐酸后温度会升高),调至接近目的ph时,观察温度变化并用加热(水浴,微波)或冰浴的方法调节温度至25℃±0.2℃,使温度在25℃±0.2℃时刚好达到所需ph值(ph值允许误差±0.01)。
3,ph值调节完毕后,用容量瓶定容至1l,0.45μm滤膜过滤,倒入试剂瓶中保存,标记好日期和名称。
4,配1lph8.0的tris,约需要42ml浓盐酸。
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