tris电泳缓冲液配方
50tae稀释成1tae怎么操作?
50tae稀释成1tae怎么操作?
一般先配制50倍的TAE缓冲液,用时再稀释成1倍的。
50倍TAE缓冲液的配制方法为
1. 称取下列
试剂
于1L
烧杯
中: Tris 242g
Na2
EDTA
.2H2 O 37.2g
2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3.加入57.1mL的醋酸,充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至1L后,室温保存
聚丙烯酰胺电泳的缓冲液配方是什么?
分离胶是下层胶,其中的缓冲液为pH8.8的Tris-HCl。
浓缩胶是上层胶,其中的缓冲液为pH6.8的Tris-HCl。
电泳缓冲液为Tris、glycine和SDS配制,只要用规定质量的粉末配制,就不用调pH。
dna电泳缓冲液ph要求?
在做DNA电泳的时候,缓冲液的要求是ph8,因为DNA为碱性所以缓冲液必须为碱性,否则会进行中和反应破坏遗传物质。至于8这个值则是因为DNA为碱性物质,在电泳(缓冲液pH8)时带负电荷,在一定的电场力作用下向正极泳动,利用DNA中各物质量和荷质比这个常数来呈现电泳图。
rt负极静置条件?
一.所用试剂
1.0.01MPBS缓冲液,PH7.4 :高压灭菌,40C保存。临用前-200C放置30分钟,确保冰冷。
2.焦碳酸二乙酯(DEPC):sigma公司,40C保存。
3.0.1TPC处理的灭菌去离子水:100ml去离子水中加入0.1mlDEPC,剧烈振荡混匀,让DEPC充分进入溶液中,370C放置过夜,高压蒸汽灭菌30分钟除去DEPC。40C保存。
4.单相细胞裂解试剂TRizoL:Invitrogen生命技术公司,40C保存。临用前-200C放置30分钟,确保冰冷。
5.氯仿:用新开封的,10ml分装,40C保存。临用前-200C放置30分钟,确保冰冷。
6.异丙醇:用新开封的,20ml分装,40C保存。临用前-200C放置30分钟,确保冰冷。
7.0.1TPC处理的75%乙醇:无水乙醇75ml加0.1TPC处理的灭菌去离子水至100ml,4C保存。临用前-200C放置30分钟,确保冰冷。
反转录试剂盒:MBI公司,-200C保存。
9.2xPCR试剂:MBI公司,-200C保存。
10.5xTBE RNA电泳缓冲液:因为Tris碱可与DEPC发生反应并使之失活,所以含Tris碱的电泳缓冲液可用DEPC处理的灭菌去离子水配制,0.22um滤器过滤除菌。室温保存,临用前用DEPC处理的灭菌去离子水10倍稀释。使用本室RNA专用电泳槽,每次需配制0.5x电泳缓冲液500ml。
11.50xTAE DNA电泳缓冲液:室温保存,临用前用去离子水50倍稀释。使用本室DNA专用电泳槽,每次需配制1x电泳缓冲液1000ml。
12.6x上样缓冲液:1.5mlDEPC处理的灭菌离心管中称取2.5mg溴酚蓝,加入0.3ml甘油,DEPC处理的灭菌去离子水定容至1ml,40C保存。
13.1.5%琼脂糖:RNA电泳,1.5g琼脂糖加入0.5xTBE RNA电泳缓冲液中;DNA电泳, 1.5g琼脂糖加入1xTAE DNA电泳缓冲液中。微波炉煮沸熔化后,冷却至600C左右,每100ml胶加入溴化乙啶(EB,10mg/ml)5ul。
14.溴化乙锭(10mg/ml):在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温。
15.人淋巴