westernblot具体操作步骤 做western blot时,加样时样品从孔中飘出来,总加不进去是什么原因?

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做western

做western blot时,加样时样品从孔中飘出来,总加不进去是什么原因?

blot时,加样时样品从孔中飘出来,总加不进去是什么原因?

仔细检查一下,是不是胶配的有问题,把加样空堵了,另外确认一下loading buffer有没有问题。

westernblot压胶用什么?

westernblot压胶用橡胶生胶粉

检测小鼠细胞内蛋白表达量,westernblot的一抗要用鼠源的吗?

不是啊,一定要用抗小鼠的抗体,但是来源可以是其他物种,大鼠,兔,山羊等。

Western blot,第一次电泳用了1H 30MIN,中间重配了缓冲液,电泳竟然用了3H,缓冲液配的不好,还是错了?

外槽液可以回收重复使用3-4次,而内槽液必须每次都用新的。
你说的是比以前用的电泳时间长了,会不会是你的胶里有气泡呢?

pcr和westernblot有什么区别?

PCR是从转录水平上检测目的基因,而非蛋白,从转录到翻译还有复杂的过程,因此基因的表达量与蛋白的表达量不一定是正相关的。
WB只能半定量,但是可以检测细胞膜蛋白,这点ELISA做不到,ELISA可用定量方法检测蛋白,也就是说你可以观察不同浓度刺激物对目的蛋白的影响。
基因翻译蛋白质,PCR可以检测基因的表达量,绝对定量和相对定量。但基因翻译表达蛋白质是个复杂的过程,有可能出现基因量大而蛋白质少,或者相反,甚至其他情况。所以,PCR是从基因层面DNA或mRNA进行的检测, 而Western Blot是目前一种结合内参对蛋白质进行半定量的方法

sdspage和westernblot有什么区别?

sds page 胶是用来分离蛋白的,而western blot是用sds page 胶分离蛋白后再转膜,然后用一抗二抗孵育,最后显色,出现蛋白条带的一个检测蛋白的方法。

western blot实验都需要哪些仪器?

western blot实验都需要的基础仪器有: 电泳仪,制胶板,电泳槽,湿转的转膜槽或者半干转仪,脱色摇床,暗室,X光片,红外灯,成像仪,一些基础耗材和试剂等 基本上生化实验室要做western blot还是很容易的