细胞实验室设计需要实验台吗
细胞周期实验固定时间为多长?
细胞周期实验固定时间为多长?
流式测细胞周期前,如何固定细胞?实验室做流式的时间固定一周的两天,所以细胞只好收集起来固定几天后再做,那么一般用什么方法来固定时间了?以下是我为大家收集的几个处理方法:
一、用冰乙醇固定的问题:
1,PBS洗涤2次。
2,离心时采取800~1000rpm 5min(我不知道离心力是多少)。我们没有要求4度离心。(效果一样。)
3,细胞数的要求不是很严,我们可以这样估计一下:流式最终上机需要至少6000~10000个细胞,调试仪器如果需要20000个的话(做周期很好调的)一共是30000个细胞。做染色要PBS洗2次,pc buffer后洗一次,共3次,按每次损失20%(实际上没有这么多,只要操作小心,我们实验室的高手做Annexin V据说只用1w个细胞就可以开始做!!!其实也就是少丢弃细胞的意思)计算,需要不超过5w个,固定时洗涤两次,最多不超过8w个细胞,也就是说,1*10-6个细胞足以!!实际上操作也是这样,细胞数过多,如果染色的时候不舍弃一些的话,会造成染色剂相对不足以及容易堵管。因此在做染色时需要调整细胞数。
4,我们实验室用软试管将加入冰乙醇的细胞封口,-20度保存,保存3个月没问题(我最长做的是3个月,老师们说半年没问题)。EP管如果封口严密也没有问题。
二、70%预冷酒精固定:
(注意控制细胞数量,大约1,000,000个左右,)
1, 细胞消化后用PBS洗一次,(最好用DMEM 胰酶消化,否则细胞不容易成但单细胞,且消化过程中不要去移动瓶子)
2,用200微升PBS制成细胞悬液,加预冷的70%酒精2毫升,边加边摇匀,后置4度冰箱,一般一个小时就差不多了,跟培养时间应该没多少关系
3,弃上清,PBS洗一次,然后加400微升PBS成细胞悬液,然后加50微升PI.后避光,送检。
分子细胞生物实验室有哪些?
分级寺堡生物实验室。包含,三个教学实验室和两个准备室,主要承担三个学科的面向深入科学。生物技术,生命科学。奥林学院本科生的相关实验课程。
教学实验室主要承担细胞生物学学科。基因工程,原理和技术实验。细胞工程原理与技术实验。细胞生物学实验。
做实验一般是用超纯水还是纯水?
不同的实验要求不同,比如细胞实验室肯定会用到纯水、超纯水的;不过细胞实验室用水量不会太大,可以选用小型实验室纯水系统,现用现制;例如赛多利斯arium? mini 实验室纯水系统是针对实验室用水量低于10L而设计,用于制备非关键应用所需的缓冲液和培养基。